細(xì)胞名稱(chēng) 豚鼠皮膚細(xì)胞；GP-S2
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性豚鼠的皮膚組織。2001年由中國(guó)*昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法（-）
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 豚鼠皮膚細(xì)胞；GP-S2 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
貨號(hào) | EY-X63751 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%*消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生*的細(xì)胞，以0.25％*消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生*的細(xì)胞用*消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
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Pedaliin
CAS No.：22860-72-6
中文名：胡麻素-6-O-葡萄糖苷
分子式：C22H22O12
大車(chē)前苷 訂購(gòu)|咨詢 嗜鉻蛋白B(CHGB) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
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SA2 粘結(jié)蛋白SA2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium acetate, anhydrate
phosphoREC8(Ser251) 減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Agarose, low gelling temperature
SMC2 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Potassium phosphate, monobasic, anhydrous
SMC4 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml 6Benzylamino purine
SMC5 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Water
SMC6 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白6抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Maleic acid
TRIP1/PSMC5 甲狀腺受體相互作用蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ammonium sulfate
Separase 紡錘體級(jí)以外蛋白樣1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Cesium chloride
戊相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:0．25ml 英文名稱(chēng)：
水楊相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱(chēng)：
戊標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱(chēng)：Valproic Acid
昂丹司瓊雜質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:30mg 英文名稱(chēng)：
昂丹司瓊標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:300mg 英文名稱(chēng)：Ondansetron
*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱(chēng)：
*標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱(chēng)：Venlafaxine Hydrochloride
酒石吡坦標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng)：Zolpidem Tartrate CIV
式?jīng)]食子鉍標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:2g 英文名稱(chēng)：Bismuth Subgallate (AS)
克拉混合物R標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱(chēng)：
豚鼠皮膚細(xì)胞；GP-S2馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)規(guī)格：250g用途：用于霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))
無(wú)菌取樣袋（帶鐵絲）（30cm*18cm）規(guī)格：50個(gè)/包*4用途：用于樣品的取樣采集。
察氏瓊脂規(guī)格：250g用途：用于青霉、曲霉鑒定及保存菌種用(GB標(biāo)準(zhǔn))
凍干兔血漿規(guī)格：0.5ml*10用途：用于金黃色葡萄球菌的血漿凝固酶試驗(yàn)（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)）。
李氏菌增菌肉湯（LB1）規(guī)格：9ml*20支/包用途：用于李氏菌二步增菌
改良月桂基硫鹽胰蛋白胨肉湯-*規(guī)格：10ml*20支/包用途：用于阪崎桿菌選擇性增菌培養(yǎng)
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